Как измерить рост бактерий

Posted on
Автор: John Stephens
Дата создания: 24 Январь 2021
Дата обновления: 1 Июль 2024
Anonim
Самый долгий эволюционный эксперимент [Veritasium]
Видео: Самый долгий эволюционный эксперимент [Veritasium]

Содержание

В этой статье: Наблюдение за бактериями напрямую. Измерение биомассыПроцедура с помощью турбидиметрии8

Есть несколько способов измерить рост бактерий, и некоторые из них труднее реализовать, чем другие. Наиболее простые из них обычно используются и дают относительно точные результаты, при условии, что они точны во время измерений. Наиболее распространенными методами являются наблюдение и подсчет бактерий, измерение биомассы и сухой биомассы и турбидиметрия. В вашей школьной лаборатории должно быть оборудование, необходимое как минимум для одного из этих методов.


этапы

Метод 1 из 3: Наблюдайте за бактериями напрямую



  1. Подготовьте оборудование. В дополнение к тому, что обычно можно найти во всех биологических лабораториях, вам понадобятся некоторые конкретные предметы. Убедитесь, что у вас под рукой есть все инструменты и контейнеры, чтобы вам не приходилось ходить туда-сюда в шкафу, где хранится оборудование. Подумайте заранее, что вы будете делать, чтобы знать, что вы будете использовать на каждом этапе. Вам также необходимо знать некоторые ключевые термины.
    • Получить гемоцитометр. Это лезвие с камерами нумерации, которое связано с микроскопом. Это очень простой инструмент для настройки и использования. Вы можете найти некоторые из поставщиков, специализирующихся на оборудовании для школ и исследовательских лабораторий. Руководство пользователя обычно предоставляется.
    • Возьмите чашку Петри. Это небольшой, круглый, неглубокий контейнер, в котором можно наблюдать бактерии.
    • Термин «культура» относится к микроорганизму, который искусственно размножается как часть научного эксперимента.
    • «Бульон культуры» - это среда, в которой будет развиваться культура.



  2. Используйте чашку Петри. Поместите бактерии в коробку и наблюдайте за ней под микроскопом. Вы также можете положить его прямо на слайде. Затем подсчитайте количество присутствующих бактериальных клеток.


  3. Убедитесь, что у вас правильная концентрация. Если бактерий слишком много, они будут перекрываться, и вы не сможете их правильно подсчитать. Если это так, разбавьте культуру, смешав ее с небольшим количеством бульона. Если их будет слишком мало, результат не будет значительным. Затем необходимо отфильтровать бульон, чтобы увеличить концентрацию.


  4. Подсчитайте бактерии. Последний шаг - просто посчитать. Посмотрите на счетные камеры под микроскопом и отметьте количество клеток, которые вы видите. Сравните результат с другими подобными событиями.

Метод 2 из 2: Измерение биомассы




  1. Убедитесь, что у вас есть необходимые инструменты. Этот метод медленен в реализации и предполагает использование дорогостоящего оборудования. Если вы не моете его, используйте другую технику. С другой стороны, если в лаборатории, в которой вы находитесь, есть нужные инструменты, измерение биомассы и сухой массы идеально, потому что оно дает точные результаты. Вам нужно:
    • печь с принудительной конвекцией,
    • алюминиевая чаша для взвешивания,
    • несколько колб Эрленмейера,
    • центрифуга или лабораторная система фильтрации.


  2. Убедитесь, что урожай находится в колбе Эрленмейера. Если это не так, залейте его. На этой стадии эксперимента бактерии все еще находятся в культуральном бульоне. Они будут отделены позже.


  3. Высушить чашу весов. Для этого поместите его в духовку. Также можно использовать мембранный фильтр из ацетата целлюлозы диаметром 47 мм с порами 0,45 мкм. Какой бы инструмент не использовался, точно измерьте его массу, чтобы его можно было вычесть из результатов, которые вы получаете, когда на него помещается культура.


  4. Mix. Агитировать lerlenmeyer так, чтобы культура была однородной. Действительно, из-за силы тяжести клетки естественным образом имеют тенденцию падать на дно контейнера. Таким образом, вы должны немного встряхнуть, для которых распределяются равномерно и что ваш образец является более представительным.


  5. Центрифуга. Используя центрифугу, отделите бактерии от культурального бульона. Это устройство используется для вращения контейнера и противовеса на очень высокой скорости. Бульон течет, который хранит только живую материю. Для получения дополнительной информации вы найдете информацию о том, как использовать центрифугу в Интернете.


  6. Получить тесто. Положите его на чашу весов. Вы можете бросить культуральный бульон, он вам больше не понадобится, но держите lerlenmeyer под рукой.


  7. Промыть центрифугу. Налейте промывочную воду на чашу весов в дополнение к бактериальным клеткам. Результат, полученный для всего, дает вам биомассу.


  8. Найдите сухую массу. Чтобы узнать сухую биомассу вашего образца, поместите чашку весов в духовку, установленную на 100 ° C, на период от 6 до 24 часов, в соответствии с инструкциями, прилагаемыми к вашему устройству. Будьте осторожны, чтобы не превысить эту температуру, чтобы избежать сжигания бактерий. Затем взвесьте все, затем вычтите массу лотка.

Метод 3 из 3: Продолжить с помощью турбидиметрии



  1. Подготовьте свое оборудование. Вам понадобится источник света и спектрофотометр, устройство, которое можно найти в большинстве научных лабораторий. Обратитесь к прилагаемому руководству пользователя, поскольку каждая модель работает самостоятельно. Этот метод является одним из наиболее часто используемых для измерения роста бактерий, поскольку он требует только недорогих и простых в использовании инструментов.


  2. Принесите свет в культуру. Мутность используется для оценки содержания жидкости в частицах, она определяет, является ли она более или менее мутной. Результат, который вы получите от этого измерения, будет дан в NTU (или в нефелометрических единицах мутности). Может потребоваться выполнить калибровку устройства, чтобы точно измерить мутность образца.


  3. Делайте заметки. Мутность - это количество бактерий в образце. Спектрофотометр также позволит вам узнать коэффициент пропускания раствора (% T), значение которого обратно пропорционально значению мутности. Затем сравните результаты, полученные на разных образцах, чтобы измерить рост бактерий.